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假病毒
來源：萬物生物 發(fā)布時(shí)間：2021-11-01
假病毒（pseudovirus)是病毒衣殼蛋白或者包膜蛋白包裹攜帶有報(bào)告基因的異源核酸形成的類似于真病毒的具有感染性的病毒顆粒，由于被包裹的核酸不具有復(fù)制形成病毒的全部核酸序列的能力，所以假病毒只有一輪的感染力，操作比較安全。
假病毒主要通過多質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293T或293FT細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)自行復(fù)制、表達(dá)組裝形成，通過收集培養(yǎng)基上清或者裂解細(xì)胞等方法獲得。
假病毒具備和真病毒一樣的感染性，進(jìn)入細(xì)胞的過程和真病毒一樣，但其進(jìn)入細(xì)胞后不具有復(fù)制產(chǎn)生病毒的能力，因而沒有危害，可以更安全地用于中和抗體和抗病毒藥物檢測(cè)。對(duì)傳染性強(qiáng)、致病性強(qiáng)的病毒，如SARS-CoV，Ebola病毒，狂犬病毒，H7N9等的研宄具有極大的危險(xiǎn)性，而且數(shù)量有限，而假病毒安全性好，并可以通過轉(zhuǎn)染技術(shù)大量制備，為這些危險(xiǎn)性高的病毒研宄提供了方便。
假病毒體系有多種，主要包括以慢病毒載體構(gòu)建的假病毒，以病毒蛋白自組裝形成的假病毒，以及以病毒基因改造、插入報(bào)告基因所形成的假病毒。慢病毒載體是以HIV-1 為基礎(chǔ)發(fā)展起來的，包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息，可提供所有轉(zhuǎn)錄并包 裝RNA到重組假病毒所需要的全部輔助蛋白，利用表達(dá)載體和包裝質(zhì)粒同時(shí)共轉(zhuǎn)染細(xì)胞， 在細(xì)胞中進(jìn)行病毒包裝，包裝好的病毒顆粒分泌到細(xì)胞外培養(yǎng)基中。
假病毒體系的特點(diǎn)是克服了傳統(tǒng)方法的缺陷，使檢測(cè)技術(shù)更安全、簡(jiǎn)便、快速、高通量，而且使一些本身很難培養(yǎng)的病毒也能采用培養(yǎng)的方法進(jìn)行檢測(cè)。
假病毒標(biāo)準(zhǔn)品要求：
1. 假病毒標(biāo)準(zhǔn)品具有和待檢測(cè)目的病毒同樣或者類似的理化性質(zhì)，如均為包裹了核酸物質(zhì)的蛋白顆粒。
2. 假病毒標(biāo)準(zhǔn)品攜帶了與待檢測(cè)目的病毒相同的探針核酸片段。
3. 假病毒標(biāo)準(zhǔn)品純度足夠高，生產(chǎn)時(shí)需去除外源污染性核酸物質(zhì)。
假病毒與核酸檢測(cè)試劑盒：
假病毒在檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用主要為病毒核酸檢測(cè)試劑盒中作為陽性對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)品。最新的CFDA申報(bào)指導(dǎo)原則中，要求病毒核酸檢測(cè)試劑盒用假病毒作為陽性標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)品。