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本公司產(chǎn)品僅供科研使用
您現(xiàn)在所在位置:主頁 > 產(chǎn)品中心 > 蛋白質(zhì)與免疫印跡 試劑 | 耗材 >>凝膠染色 >> 考馬斯亮藍 G-250*10g
產(chǎn)品簡介
考馬斯亮藍G-250法于1976年由Bradform建立。考馬斯亮藍G-250具有紅色和藍色兩種色調(diào),在酸性溶液中,其以游離態(tài)存在呈棕紅色,當它與蛋白質(zhì)通過疏水作用結(jié)合后,變?yōu)樗{色。色素對可見光譜的最大吸收值從465nm轉(zhuǎn)移到595nm處。蛋白質(zhì)和色素的結(jié)合反應(yīng)很快速,約在2分鐘左右的時間內(nèi)達到平衡,在室溫1小時之內(nèi)是穩(wěn)定的。在0.01-1.0mg蛋白質(zhì)/ml范圍內(nèi),蛋白質(zhì)含量與A 595值呈正比。
使用說明
生化試劑的用法用量主要根據(jù)客戶的實驗?zāi)康暮同F(xiàn)有文獻或書籍中的實驗方法來決定,以下用途僅供參考。
1. 本產(chǎn)品可以用于蛋白質(zhì)的定量檢測??捡R斯亮藍的配制方法參考:稱取50mg考馬斯亮藍G-250,加入95%乙醇25mL溶解,加85%磷酸50mL,然后用蒸餾水定容到500mL,過濾去除少量未溶解物,4℃保存?zhèn)溆?。使用時需要按1:5用蒸餾水稀釋上述濃染料結(jié)合溶液之后再加入到每個待測樣本中,作用5~30min。染液與蛋白質(zhì)結(jié)合后,將由紅色變?yōu)樗{色,在595nm波長下測定其吸光度來反映蛋白量。
2. 本產(chǎn)品也可用于電泳蛋白的快速染色,不需要脫色。使用參考方法如下:將0.2 g G250溶于100 mL水中(加熱至50°C促進溶解)。冷卻后,再加入100 mL 2 N H2SO4。室溫放置三小時-過夜,然后濾紙除雜。過濾后的溶液,小心加入22.2 mL 10 N KOH,然后加入28.7 g TCA。混勻后室溫放置>3 h,再次過濾除雜從而獲得琥珀般的棕色溶液,不含藍色沉淀。染色時只需要將膠完全浸在此染色液中,約15 min后條帶就會顯示出來。
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
3)考馬斯亮藍和皮膚中蛋白質(zhì)通過范德華力結(jié)合,反應(yīng)快速,并且穩(wěn)定,無法用普通試劑洗掉。待一兩周左右,皮屑細胞自然衰老脫落即可無礙。
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