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產(chǎn)品詳情
操作說明
注意事項
產(chǎn)品簡介
考馬斯亮藍G250能與蛋白質(zhì)快速結(jié)合。考馬斯亮藍G250在游離狀態(tài)下呈紅色，最大光吸收在488 nm，其與蛋白質(zhì)結(jié)合后在595 nm處有最大吸收值，并且光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比，因此可用于蛋白質(zhì)的定量檢測。
儲存與運輸
常溫保存與運輸，有效期12個月。
使用方法
1. （可選）繪制標(biāo)準曲線（酶標(biāo)儀法）：將BSA用水溶解配制0.5 mg/mL的蛋白標(biāo)準工作液。將蛋白標(biāo)準工作液分別按0，1，2，4，8，12，16，20 μL加到96孔板中，然后用PBS或生理鹽水依次加20，19，18，16，12，8，4，0 μL將上述梯度工作液補足到20 μL。得到蛋白濃度依次為0，25，50，100，200，300，400，500 μg/mL的梯度曲線。如只是做相對定量比較，則無需繪制標(biāo)準曲線。
2. 準備待測樣品：將待測的蛋白樣品進行適當(dāng)稀釋（可通過預(yù)實驗檢測，使樣品蛋白濃度在標(biāo)準曲線范圍內(nèi)，確保檢測結(jié)果可信），按照每個樣品20 μL的量加到96孔板中。待測樣品稀釋需與蛋白標(biāo)準品用相同溶液。
3. 檢測：向以上每孔加入200 μL考馬斯亮藍G250溶液充分混勻（可將96孔板放在振蕩器上振蕩30 s），室溫放置3-5 min后，以標(biāo)準曲線0號做參比，在595 nm波長下比色測定，記錄各孔吸光度值。
4. 計算：以標(biāo)準曲線中梯度蛋白含量（μg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準曲線。根據(jù)所測樣品的吸光值，在標(biāo)準曲線上即可查得相應(yīng)孔中待測樣品的蛋白濃度（μg/mL），再乘以樣品稀釋倍數(shù)即為待測樣品實際蛋白濃度。
另：如用分光光度計測定，則用玻璃試管或玻璃比色管為反應(yīng)容器制作標(biāo)準曲線。待測蛋白樣品做適當(dāng)稀釋后，加入到新的玻璃試管或比色管中，樣品量為1 mL。向標(biāo)準曲線梯度管及樣品管中各加入考馬斯亮藍G250溶液3 mL，充分混勻，室溫靜置3-5 min后用分光光度計進行比色檢測。
檢測時分光光度計波長設(shè)置595 nm，以標(biāo)準曲線0號管為參比調(diào)零，檢測標(biāo)準曲線及待測樣品。按照步驟4的方法繪制標(biāo)準曲線及計算待測樣品中的蛋白濃度。
注意事項
1. 本產(chǎn)品使用前需恢復(fù)至室溫，并顛倒混勻，以免影響檢測的靈敏度。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問，請于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進行核對檢驗。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問題，請于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進行質(zhì)檢，確認產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價格范圍之賠償。客戶在使用過程中有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話我們隨時給予解答。
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