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產(chǎn)品簡介
G-418(Geneticin,遺傳霉素),也稱為G418,是一種氨基糖苷類抗生素,其結(jié)構(gòu)與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似。G-418能通過抑制轉(zhuǎn)座子Tn601,Tn5的基因表達(dá),干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞都有毒性。
在分子遺傳實(shí)驗(yàn)中,G-418是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染最常用的抗性篩選試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后,能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G-418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G-418的這一選擇特性,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
主要參數(shù)
分子式:C20H40N4O10·2H2SO4
分子量:692.7
性狀:白色或灰色粉末
溶解性:易溶于水
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
冰袋(wet ice)運(yùn)輸,-20℃保存,有效期24個(gè)月。
使用說明
可用PBS緩沖液溶解本產(chǎn)品,配制50 mg/mL或其他濃度的儲(chǔ)存液,過濾除菌后分裝成小份置于-20℃保存。臨用前融化均勻后稀釋至所需濃度。溶液避免反復(fù)凍融。
篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞,推薦起始篩選濃度為400 μg/mL。篩選植物細(xì)胞,推薦起始篩選濃度為10 μg/mL。篩選酵母,推薦起始濃度為500 μg/mL。建議根據(jù)具體篩選材料及起始濃度作用效果進(jìn)行調(diào)整,確定最佳篩選濃度。
以篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,將細(xì)胞制成懸液稀釋至1000個(gè)細(xì)胞/mL,取100μL細(xì)胞懸液加入含培養(yǎng)基的24孔板中,將每孔中G-418終濃度調(diào)整至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000μg/mL等梯度,每3-5天更換含G-418的篩選液,培養(yǎng)10-14天,以使全部細(xì)胞死亡的最低G-418濃度進(jìn)行下一步篩選。此步驟僅供參考,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)試劑情況調(diào)整。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
合肥萬物生物科技有限公司
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