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產品詳情
操作說明
注意事項
產品簡介
RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液常用于采集動物組織時，僅需室溫操作，即可迅速抑制RNase并穩(wěn)定保存組織樣品中的RNA。本產品使用范圍廣，不僅可廣泛用于新鮮動物組織樣品如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、心臟、肌肉等，同時也可用于RNA病毒、培養(yǎng)細胞、真菌、細菌、血液以及某些植物樣品的保存，更加適合樣品收集后不能夠立即進行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情況，特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的動物組織樣品和不能立即凍存樣品的RNA穩(wěn)定與保存。本產品的效果和液氮凍存的效果相當。本產品可以迅速滲透到組織內部，完全抑制內源性RNase活性，避免RNA降解，保持樣本中RNA的完整性，并且和液氮一樣可長期保存樣品中的RNA。本產品安全便捷，無任何毒性和刺激性，可室溫使用，確保了使用時的安全和便捷，與使用液氮相比，可有效避免因使用超低溫的液氮而引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患，并且攜帶、運輸非常方便。在本產品中樣品的保存時間和存儲溫度相關，例如37℃可保存1～2天，室溫25℃可保存一周，4℃可以保存1個月，-20℃或更低溫度可以長期保存。
儲存與運輸
室溫運輸；室溫保存，24個月有效。
組成
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Component |
G3019-100ML |
G3019-1.2ML |
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RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液 |
100 mL |
70×1.2 mL |
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產品說明書 |
1份 |
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操作流程
1. 樣品處理
a) 動物組織：將組織剪切成合適大小后（建議組織塊長寬高均不大于0.5 cm），然后迅速完全浸泡于5～10倍體積的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中。（注意：已浸入RNAsolid試劑中的組織經平衡一段時間后，可從溶液中取出，切成更小的組織塊，再重新放回RNAsolid試劑中；有些比較弱的液體滲透性組織如骨頭等，不適合用本品進行RNA保護。）
b) 植物組織：本品對于柔軟的植物組織（如嫩葉，嫩莖）可直接滲透，且達到理想的RNA保護效果。將組織切成合適的大?。ńㄗh長寬高均不大于0.5 cm）后，然后迅速完全浸泡于5～10倍體積的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中。（注意：某些植物組織天生具有的屏障，如葉子表面的蠟層可阻礙RNAsolid試劑的滲透，對于此類組織，通常需破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。）
c) 細胞等樣本：收集細胞沉淀（用PBS清洗1-2次），之后迅速小心加入200-300 μL RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液，避免將細胞沉淀沖起，避免細胞重懸。
d) 酵母、細菌等樣本：離心棄上清，收集一定量的菌體沉淀，然后迅速加入200-300 μL RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液完全浸沒菌體沉淀。
e) 全血樣本：收集100-300 μL新鮮的血液樣品，加入含抗凝劑（EDTA鈉鹽、鉀鹽、肝素或檸檬酸鹽等）的抗凝管中，顛倒混勻。按1：5的比例加入試劑，例如200 μL的血液加入1000 μL的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液，顛倒混勻；對于血清或血漿也可按照1：5比例加入RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液保存。
f) RNA病毒等：對于拭子樣品采集后，將拭子直接加入含有0.5-1 mL的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中進行保存；對于液體等樣品采集后加入5-10倍體積的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液，然后置于相應溫度條件下保存。
2. 樣品保存
加入有RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液的樣本可在37℃保存1～2天，2天以后部分組織中的RNA會開始降解。室溫（25℃）穩(wěn)定保存1周，不會有明顯的RNA降解發(fā)生。大部分樣品置于RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中，4℃條件下可穩(wěn)定保存1個月，不會有明顯的RNA降解發(fā)生。如果需要將樣品長期保存，先使保存在RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中的樣本于4℃浸透過夜，然后將再樣本直接放入-20℃或-80℃，可長期穩(wěn)定保存3～5年（為了后期加快解凍也可在放入-20℃或-80℃保存前將RNAsolid保護液吸出棄去）。
3. RNA提取
a) 組織樣本：用潔凈鑷子從RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中取出組織塊，然后用干凈的吸水紙吸掉表面液體。之后立即置于合適的裂解液中勻漿或液氮中進行研磨操作，后續(xù)即可采用Trizol或離心柱法等進行RNA提取操作。
b) 細胞、細菌類樣本：對于細胞、細菌類樣本盡量保持離心后的沉淀處于緊實狀態(tài)，避免重懸，否則可能會對后續(xù)RNA得率有一定影響。在保存的樣本中加入與RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液等體積的PBS或DEPC水，5000-10,000g離心1-5分鐘收集沉淀樣品，小心吸除上清液，后續(xù)即可采用Trizol或離心柱法進行RNA提取操作。
c) 全血、病毒類液體樣本：參考后續(xù)使用RNA提取產品說明書進行操作。
注意事項
1. 實驗中獲得的組織樣品適當處理大小后，應迅速并完全浸泡在RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中。
2. 使用本產品在-20℃或-80℃凍存的樣品，反復凍融3-5次不會顯著影響RNA的質量。通常情況下，推薦把本產品保存的樣品在室溫或4℃運輸或短期存放，-20℃或-80℃長期存放。如-20℃或-80℃長期存放，須先4℃存放過夜或更長時間后，才能轉移到更低溫度存放。
3. 本產品適用于新鮮動物組織樣品或細胞中RNA的穩(wěn)定與保存。樣品凍存后再用RNAsolid保存的效果會比直接將新鮮樣品用RNAsolid保存差很多。本產品盡管對于凍存的樣品也有一定的穩(wěn)定保存作用，但更適合新鮮樣品。
4. 本產品保存的組織樣品能用常規(guī)的RNA抽提方法進行RNA抽提，如Trizol法和離心柱法等，使用時直接將樣品從RNAsolid試劑中取出當作常規(guī)的新鮮或凍存樣品即可，少量殘留的RNAsolid試劑不會影響后續(xù)提取效果。
5. 本產品也可用于組織中蛋白和DNA的保存，但RNAsolid會導致蛋白質變性，后續(xù)可進行Western Blot、SDS-PAGE等實驗，而不適用于蛋白或酶功能活性測試等實驗。樣品從RNAsolid試劑中取出后可直接參考新鮮或凍存樣品并按照常規(guī)方法進行蛋白提取。
6. 用本產品保存后，樣品可能會變得微硬，為正常現象，不會影響后續(xù)RNA抽提時組織的勻漿、裂解等操作。
7. -20℃或-80℃保存情況下，樣品解凍時RNAsolid試劑中可能有結晶析出，屬正?，F象，可待結晶完全溶解后使用，不會影響后續(xù)RNA的抽提效果。
8. 血液白細胞樣品按照常規(guī)方法分離后，可以參考細胞樣品的方法進行保存。
9. 用于植物樣品保存時，應當去除表面蠟質，確保RNAsolid試劑能充分滲透進入組織內部。
10. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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