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本公司產(chǎn)品僅供科研使用
您現(xiàn)在所在位置:主頁 > 產(chǎn)品中心 > 病理形態(tài)試劑 | 耗材 >>免疫熒光試劑 >>封片劑/淬滅劑 >> 組織自發(fā)熒光淬滅劑
產(chǎn)品簡介
免疫熒光技術(shù)利用熒光分子標(biāo)記的抗體對與之結(jié)合的抗原進(jìn)行定位,實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)、聚糖蛋白、小生物分子及非生物分子等進(jìn)行亞細(xì)胞可視化觀察。在此過程中,組織中的自發(fā)熒光往往會嚴(yán)重干擾觀察。自發(fā)熒光是在免疫熒光檢測過程中產(chǎn)生的與目的信號無關(guān)的背景熒光信號的統(tǒng)稱,其產(chǎn)生的原因主要來自于組織本身的組分,例如黃素、卟啉、植物葉綠素、膠原蛋白、彈性蛋白、紅細(xì)胞、脂褐素等都會產(chǎn)生較強(qiáng)的自發(fā)熒光,顯著影響免疫熒光實(shí)驗(yàn)的信噪比。此外組織固定中使用的福爾馬林、多聚甲醛等物質(zhì)也會產(chǎn)生大量的自發(fā)熒光。
本產(chǎn)品可有效減少組織自發(fā)熒光,提高免疫熒光檢測的信噪比。其中A液有效成分為二價(jià)銅離子,可有效減少紅細(xì)胞的自發(fā)熒光,B液有效成分為蘇丹黑,能顯著降低脂褐素引起的自發(fā)熒光。
儲存與運(yùn)輸
常溫避光保存,有效期12個(gè)月。
使用方法
1. 免疫標(biāo)記前的自發(fā)熒光淬滅:組織切片在經(jīng)過抗原修復(fù)以后,用組化筆畫圈圈出組織,然后滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑A液覆蓋組織室溫孵育30 min,純水洗5 min。
2. 組織切片進(jìn)行常規(guī)的封閉、一抗孵育、二抗孵育、DAPI復(fù)染細(xì)胞核等免疫熒光檢測步驟。
3. 免疫標(biāo)記后的自發(fā)熒光淬滅:滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑B液覆蓋組織室溫避光孵育5 min,流水沖洗3 min。
4. 封片:玻片置于PBS中晃動洗滌(可置于脫色搖床上)3次,每次5 min。切片稍甩干后封片,鏡檢。
注意事項(xiàng)
1. 不同樣本其自發(fā)熒光原理不同,使用組織自發(fā)熒光淬滅劑的效果可能會有差異。
2. 理論上講,針對自發(fā)熒光的淬滅劑也會一定程度降低抗體的熒光強(qiáng)度。經(jīng)測試,本試劑對自發(fā)熒光的淬滅程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出抗體熒光強(qiáng)度的降低,在二者之間有較好的平衡。
3. 加入組織自發(fā)熒光淬滅劑B液后組織會染成深藍(lán)色,但是不會影響熒光拍照。
4. 切片經(jīng)B液孵育完以后可以用水或者PBS洗滌,但不能用含吐溫的溶液洗滌,否則B液被過度洗去影響背景熒光淬滅效果。
5. 組織自發(fā)熒光淬滅劑B液每次用完后務(wù)必將瓶蓋擰緊,防止溶劑揮發(fā)。
6. 操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服,并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
合肥萬物生物科技有限公司
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