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本公司產(chǎn)品僅供科研使用
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產(chǎn)品簡介
鬼筆環(huán)肽是由鬼筆鵝膏真菌(Amanita phalloides)產(chǎn)生的一種環(huán)肽,可與F肌動蛋白結(jié)合,使F肌動蛋白保持穩(wěn)定。FITC熒光物質(zhì)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細(xì)胞的F-actin結(jié)合,從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。
本產(chǎn)品為熒光染料FITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,可用于細(xì)胞或組織的微絲熒光檢測,經(jīng)染色后細(xì)胞骨架呈綠色熒光。本產(chǎn)品使用時推薦的稀釋比為1:300-1:500。按照每張片子需要200 μL染色工作液,本產(chǎn)品足夠用于70-120張片子的染色。
儲存與運輸
冰袋(wet ice)運輸;-20℃避光保存,有效期12個月。
使用方法
1. 經(jīng)甲醛固定的細(xì)胞爬片或組織切片,PBS洗滌,稍甩干后用組化筆畫圈使組織或細(xì)胞位于圓圈中央。
2. 向圓圈內(nèi)滴加含0.1% Triton X-100的PBS或破膜液完全覆蓋組織,室溫孵育10 min,PBS洗3次,每次5 min。
3. 將本產(chǎn)品用PBS按照1:300-1:500稀釋,配成鬼筆環(huán)肽染色工作液。向圓圈內(nèi)滴加鬼筆環(huán)肽染色工作液室溫避光染色60-120 min,PBS清洗切片3次。
4. (可選做)向組織上滴加DAPI染色試劑染細(xì)胞核8-10 min,PBS清洗切片3次。
5. 切片稍甩干后,滴加抗熒光淬滅封片劑封片,熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察。
注意事項
1. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
2. 甲醇可以破壞actin蛋白,因此樣本前期固定不能使用含有甲醇的固定液。
3. 鬼筆環(huán)肽通常不具有細(xì)胞通透性,極少用于活細(xì)胞染色。
4. 操作時請穿實驗服,并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
合肥萬物生物科技有限公司
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