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產(chǎn)品簡介
蘇木素(Hematoxylin)通常與伊紅(Eosin)聯(lián)合用于染色,即HE染色。蘇木素經(jīng)氧化后生成蘇木精,是一種堿性染料,組織學中用于細胞核的染色。其染色基本原理在于,細胞核內(nèi)染色質(zhì)主要成分DNA帶負電荷,呈酸性,容易與呈堿性、帶正電荷的蘇木精染料結(jié)合而被染色。本產(chǎn)品蘇木素染液可搭配伊紅染液進行組織或細胞HE染色,染色后的細胞核呈鮮明的藍色或藍紫色。
儲存與運輸
常溫保存與運輸,有效期18個月。
實驗前準備
自備蘇木素分化液、蘇木素返藍液、二甲苯、梯度乙醇、無水乙醇、中性樹膠等。
操作步驟
1. 樣本前處理
(1) 對于石蠟切片:切片依次經(jīng)二甲苯脫蠟10 min,更換新鮮的二甲苯脫蠟10 min,無水乙醇 5min,新鮮無水乙醇5 min,90%乙醇5 min,75%乙醇5 min,自來水洗。
(2) 對于冰凍切片:-20℃保存的冰凍切片需靜置5-10 min恢復至室溫。
2. 蘇木素染色
上述處理好的切片,直接進入蘇木素染液染色3-5 min,自來水洗;再經(jīng)蘇木素分化液2-5 s,自來水洗;蘇木素返藍液返藍2-5 s,自來水沖洗。鏡下觀察細胞核呈藍色,組織背景近乎無色。然后切片依次經(jīng)70%、80%、95%、100%乙醇脫水,各3 min左右。切片再經(jīng)新鮮無水乙醇脫水3 min,二甲苯透明5 min,更換新鮮的二甲苯再透明5 min。最后用中性樹膠封片。
注:如果用于免疫組化等染色后的復染,請在其他染色完成后再進行伊紅染色。
注意事項
1. 蘇木素染液可重復使用多次,每次用完后需密封保存,防止有效成分揮發(fā)。當組織或細胞著色明顯偏淺或顏色異常時請更換新的染液。
2. 染液表面有少量氧化膜為正常現(xiàn)象,不影響染色結(jié)果。如果染液表面出現(xiàn)大量氧化膜,建議更換新的蘇木素染液。
3. 操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套。
合肥萬物生物科技有限公司
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