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通用型DNA純化回收試劑盒
價(jià)格：
在線(xiàn)咨詢(xún)
貨號(hào)：
M0k942131
產(chǎn)品規(guī)格：
100T
購(gòu)買(mǎi)數(shù)量：
產(chǎn)品詳情
操作說(shuō)明
注意事項(xiàng)
產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品編號(hào) |
規(guī)格 |
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通用型DNA純化回收試劑盒 |
M0k942131 |
100T |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用獨(dú)特的吸附柱，既能從TAE或TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA片段，又能用于直接純化PCR產(chǎn)物，滿(mǎn)足多種實(shí)驗(yàn)需要。Buffer GL中含有pH指示劑，可根據(jù)顏色來(lái)判斷溶膠或PCR產(chǎn)物回收是否達(dá)到最佳狀態(tài)。使用本產(chǎn)品可回收100 bp-10 kb大小的DNA片段，回收率可達(dá)85%。每個(gè)吸附柱每次可吸附的DNA量為20 μg。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
常溫運(yùn)輸；常溫干燥處保存，有效期12個(gè)月。
組成
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Component Number |
Component |
G3631-100T |
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G3631-1 |
Buffer BL |
50 mL |
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G3631-2 |
Buffer GL (Yellow) |
60 mL |
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G3631-3 |
Buffer PW |
2×15 mL |
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G3631-4 |
Elution Buffer |
15 mL |
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G3631-5 |
Bind DNA Mini Columns |
100個(gè) |
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G3631-6 |
Collection Tubes |
100個(gè) |
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說(shuō)明書(shū) |
1份 | |
實(shí)驗(yàn)步驟
一、從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段
1. （可選步驟）柱平衡：將吸附柱（Bind DNA Mini Columns）置入收集管（Collection Tubes）中，然后在吸附柱中加入500 μL溶液Buffer BL，10,000 g離心1 min，去除收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中(請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子)；
2. 用干凈刀片將單一目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分）放入干凈的離心管中，稱(chēng)取重量；
3. 向膠塊中加入等倍體積溶液Buffer GL（如凝膠重為0.1 g，其體積可視為100 μL，則加入100 μL溶液Buffer GL，60℃水浴至膠塊完全溶解（其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解，若膠塊的體積過(guò)大，可事先將膠塊切成碎塊）（注意：若是對(duì)于回收產(chǎn)量要求高，可在加入Buffer GL完全溶膠后再加入1/2膠塊體積的異丙醇以提高回收率；膠塊完全溶解后最好將溶液溫度降至室溫再上柱，因?yàn)槲街谑覝貢r(shí)結(jié)合DNA的能力較強(qiáng)。凝膠完全融解后應(yīng)呈現(xiàn)淡黃色，即可進(jìn)行后續(xù)操作。如果膠完全融解后溶液的顏色為紫色或紅色，請(qǐng)使用10 μL 3M乙酸鈉（pH 5.0）將溶液的顏色調(diào)為淡黃色后再進(jìn)行后續(xù)操作）；
4. 將上一步所得溶液全部轉(zhuǎn)入吸附柱中（吸附柱放入收集管中），10,000 g離心1 min，棄去收集管中廢液，將吸附柱放入收集管中（注意：吸附柱容積為800 μL，若樣品體積大于800 μL可分批加入）；
5. 向吸附柱中加入700 μL溶液Buffer PW（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），10,000 g離心1 min，棄去收集管中廢液，將吸附柱放入收集管中（注意：如果回收的DNA是用于鹽敏感的實(shí)驗(yàn)，例如平末端連接實(shí)驗(yàn)或直接測(cè)序，建議Buffer PW加入后靜置2-5 min再離心）；
6. 重復(fù)操作步驟5；
7. 將吸附柱放入收集管中，10,000 g離心2 min，盡量除去殘留液體。將吸附柱置于室溫放置5 min，徹底晾干（注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)酶切、PCR等實(shí)驗(yàn)）；
8. 將吸附柱放入一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加30~50 μL Elution Buffer或ddH2O（Elution Buffer或ddH2O 60-65℃預(yù)熱效果更好），室溫放置2 min，然后10,000 g離心2 min，收集DNA溶液（注意：洗脫液的體積不應(yīng)少于30 μL，體積過(guò)少會(huì)影響回收的效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有較大影響。若后續(xù)做測(cè)序，需使用ddH2O做洗脫液，并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，室溫放置2 min，10,000 g離心2 min，將DNA溶液收集到離心管中）。
二、從PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收DNA片段
1. （可選步驟）柱平衡：將吸附柱（Bind DNA Mini Columns）置入收集管（Collection Tubes）中，然后在吸附柱中加入500 μL溶液Buffer BL，10,000 g離心1 min，去除收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中(請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子)；
2. 預(yù)估PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積，向其中加入3倍體積的溶液Buffer GL（加入Buffer GL不少于150 μL），充分混勻（無(wú)需去除石蠟油或礦物油）（注意：若是對(duì)于回收產(chǎn)量要求高，可在加入Buffer GL后再加入3/4 PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積的異丙醇以提高回收率；混合后溶液應(yīng)呈現(xiàn)淡黃色，即可進(jìn)行后續(xù)操作。如果膠完全融解后溶液的顏色為紫色或紅色，請(qǐng)使用10 μL 3M乙酸鈉（pH 5.0）將溶液的顏色調(diào)為淡黃色后再進(jìn)行后續(xù)操作）；
3. 將上一步所得溶液全部轉(zhuǎn)入吸附柱中（吸附柱放入收集管中），10,000 g離心1 min，棄去收集管中廢液，將吸附柱放入收集管中（注意：吸附柱容積為800 μL，若樣品體積大于800 μL可分批加入）；
4. 向吸附柱中加入700 μL溶液Buffer PW（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），10,000 g離心1 min，棄去收集管中廢液，將吸附柱放入收集管中（注意：如回收DNA是用于鹽敏感實(shí)驗(yàn)，例如平末端連接實(shí)驗(yàn)或直接測(cè)序，建議Buffer PW加入后靜置2-5 min再離心）；
5. 重復(fù)操作步驟4；
6. 將吸附柱放入收集管中，10,000 g離心2 min，盡量除去殘留液體。將吸附柱置于室溫放置5 min，徹底晾干（注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)酶切、PCR等實(shí)驗(yàn)）；
7. 將吸附柱放入一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加30~50 μL Elution Buffer或ddH2O（Elution Buffer或ddH2O 60-65℃預(yù)熱效果更好），室溫放置2 min，然后10,000 g離心2 min，收集DNA溶液（注意：洗脫液的體積不應(yīng)少于30 μL，體積過(guò)少會(huì)影響回收的效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有較大影響。若后續(xù)做測(cè)序，需使用ddH2O做洗脫液，并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，室溫放置2 min，10,000 g離心2 min，將DNA溶液收集到離心管中）。
注意事項(xiàng)
1. 溶液Buffer BL的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫/潮濕或其他不良環(huán)境因素對(duì)吸附柱造成的影響，柱平衡步驟也可省略。
2. 使用前請(qǐng)先檢查Buffer PW是否加入指定量的無(wú)水乙醇。
3. 各溶液使用后請(qǐng)及時(shí)將蓋子擰緊。
產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬(wàn)物生物科技有限公司銷(xiāo)售的產(chǎn)品均有嚴(yán)格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問(wèn)，請(qǐng)于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請(qǐng)保證該產(chǎn)品，以備本公司進(jìn)行核對(duì)檢驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對(duì)本公司產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價(jià)格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價(jià)格范圍之賠償?？蛻?hù)在使用過(guò)程中有任何技術(shù)問(wèn)題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話(huà)我們隨時(shí)給予解答。
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